3"-Prozessierung von mRNA: Zusammensetzung und Dynamik des Prozessierungskomplexes und Rekonstitution von ausgewählten Faktoren

Die 3"-Prozessierung von mRNA-Vorläufern wird durch eine sehr komplexe Proteinmaschinerie katalyisiert, deren Zusammensetzung und Funktion nur unvollständig verstanden ist. Wir planen, durch eine präparative Reinigung der Prozessierungskomplexe und nachfolgende Massenspektrometrie die an der Reaktion beteiligten Polypeptide vollständig zu erfassen. Im weiteren sollen Veränderungen des Komplexes im Verlauf der Reaktion untersucht werden.Ein an der Reaktion beteiligter Faktor ist CPSF (cleavage and polyadenylation specificity factor). CPSF besteht aus vier oder fünf Untereinheiten. Wir versuchen, diesen Faktor aus isolierten Polypeptiden zu rekonstituieren, um die Funktion der einzelnen Untereinheiten untersuchen zu können