Einfluss des Y-box Proteins-1 auf die Signaltransduktion des Notch-3 Rezeptors und die Zelldifferenzierung

ME-1365/7-1
Als bislang bester negativer Prädiktor für glomeruläre Erkrankungen wird das Ausmaß der Proteinurie angesehen. Im Primärharn liegen Mediatoren vor, die eine interstitielle Entzündungsreaktion durch Aktivierung bzw. epithelial-mesenchymale Transformation (EMT) von Tubuluszellen sowie Rekrutierung von Entzündungszellen bedingen. In dem vorliegenden Antrag wird die Hypothese aufgestellt, dass bei diesem Prozess dem Y-box (YB) Protein-1, einem neuartigen extrazellulären Mediator, eine bedeutende Rolle zukommt. YB-1 wird Zytokin-abhängig sezerniert und ist im Urin von Nephritis-Patienten nachweisbar. Im two hybrid screen interagiert YB-1 mit extrazellulären Domänen des Notch-3 Rezeptors. In dem Antrag sollen die Proteininteraktion charakterisiert und Einflüsse durch YB-1 auf den Notch-Signalweg sowie die Regulation nachgeschalteter Zielgene in vitro, im Tierexperiment und an humanen Biopsaten bestimmt und phänotypische Änderungen nach extrazellulärer Zugabe von YB-1 charakterisiert werden. Ein transgenes Tiermodell wird etabliert, bei dem die Interaktionsdomäne von YB-1 mutiert ist, und der Einfluss auf entzündliche Nierenerkrankungen wird untersucht. Zusammenfassend soll in dem vorliegenden Forschungsvorhaben die Frage beantwortet werden, ob die YB-1:Notch-3 Interaktion den Verlauf entzündlicher Nierenerkrankungen reguliert.

Influence of Y-box protein-1 on the signalling of the Receptor Notch-3 and cell differentiation

The best "negative predictor" of glomerular diseases, such as IgA nephritis and diabetic nephropathy, is considered to be the degree of proteinuria. In primary urine, mediators exist that induce an interstitial inflammatory reaction through the "activation" or induction of an "epithelial mesenchymal transition (EMT)" in tubule cells, as well as recruitment of inflammatory cells. In this project, we hypothesize that Y-box (YB) protein-1, a novel extracellular mediator, plays a significant role in this process. YB-1 is secreted in a cytokine-dependent manner and is detectable in the urine of patients with nephritis. In a two hybrid screen, YB-1 interacts with the extracellular domain of the receptor Notch-3. In this project, we will characterize the protein-protein interaction(s) and determine the influence of YB-1 on the Notch pathway, as well as the regulation of downstream target genes in vitro, in animal models, and in human biopsies. A transgenic animal model is established, in which YB-1 is mutated, and the influence on inflammatory kidney diseases examined. In summary, the present research will answer the question whether the YB-1: Notch‑3 interaction regulates the course of inflammatory diseases of the kidney.