Einfluß von Stickoxid auf die Expression zellulärer Schutzsysteme im Nervengewebe (1903A/0025)

Gesamtziel des Vorhabens
Stickoxid ist ein gasförmiges Radikal, das als physiologischer Messenger in verschiedenen Organen und Organsystemen mittels NO-Synthasen (NOS) gebildet wird und zugleich im Verdacht steht, über die Bildung weiterer Radikale zytotoxisch zu wirken. Mit dem vorliegenden Projektentwurf soll die Frage beantwortet werden, ob NO eine Induktion von Schlüsselenzymen für den zellulären Schutz, wie er üblicherweise bei oxidativem Stress zu beobachten ist (Superoxiddismutase (SOD), gamma-Glutamylcystein-Synthase), im Nervengewebe bewirkt und ob dies mit einer erhöhten Resistenz der Zellen gegenüber NO-vermittelten Schädigungen einhergeht. Am Modellsystem neuroglialer Mischkulturen und neuronaler Reinzellkulturen soll die Auswirung erhöhter NO-Konzentrationen bzw. die Inhibierung der NOS auf die Aktivität und die Expression der genannten Schutzenzyme untersucht werden. Dabei gilt es, die Expression von SOD-Isoformen (Mn- und Cu/Zn-Isoform), der gamma-Glutamylcystein-Synthase und auch der NOS-Isoformen in den Zellen auf nRNA- und Proteinniveau zu erfassen.
Um Aussagen über eine mögliche kausale Beziehung zwischen der Veränderung der zellulären Kapazität der genannten Enzyme und der Resistenz der Zellen gegenüber NO-induzierten Schädigungen zu treffen, sollen Veränderungen der Schutzenzyme zur Suszeptibilität dieser Zellen in Beziehung gesetzt werden.
Die an diesem Modell gewonnenen Aussagen werden mit Hilfe histochemischer bzw. immunhistochemischer Methoden am Rattenhirn unter In-vivo-Bedingungen überprüft. Hierbei soll beim Normaltier wie auch unter pathophysiologischen Bedingungen (modellhaft: Chinolinsäureintoxikation oder entzündliche Läsion) eine mögliche Parallelität in der Expression bzw. Aktivität von NOS-Isoformen und zellulären Schutzenzymen untersucht werden.