Charakterisierung und physiologische Funktion des Ran Binding Protein 3-like, eines neues nierenspezifischen Proteins

Die gewebespezifische Expression von Genen und Proteinen ist essentiell für die entsprechende Funktion von Organen. Im Rahmen unserer Vorarbeiten konnten wir zeigen, dass in der Niere, über die Hyperosmolalität, die Expression von Nierenspezifischen Genen reguliert werden kann. Unter diesen Nierenspezifischen Genen gibt es auch bisher noch unbeschriebene Gene.Im Rahmen dieses Projektes soll das Protein RanBP3L charakterisiert werden und dessen physiologische Funktion aufgeklärt werden. Mit RanBP3L haben wir ein bisher kaum beschriebenes Protein identifiziert. In den Vorarbeiten konnten wir jedoch zeigen, dass es über Hyperosmolalität sehr stark in der Expression induziert wird und wahrscheinlich für die Adaptation an diese eine entscheidende Rolle spielt. Zusätzlich konnten wir zeigen, dass RanBP3L hauptsächlich in der Niere und dort in der Papille expremiert wird. Durch die spezifische Expression von RanBP3L in der Niere ist auch von einer wichtigen Funktion in diesem Organ auszugehen. Die genaue Funktion ist noch unbekannt. Die zellulären Signalwege und molekularen Mechanismen sind ebenfalls unbekannt und sollen im Rahmen dieses Projektes aufgeklärt werden. Es soll untersucht werden, welche Rolle RanBP3L für die Adaptation der Zellen an die Hyperosmolalität spielt und über welche Faktoren die nierenspezifische Expression von RanBP3L reguliert wird. Dazu soll die RanBP3L Expression mit Hilfe der Crispr/Cas9-Technologie herunterreguliert werden und der Effekt auf die zelluläre Funktion untersucht werden. Diese Technologie soll auch dazu verwendet werden, um zu untersuchen, ob und wie RanBP3L den SMAD-Signalweg beeinflusst. Wichtig ist auch die Identifikation der Faktoren, über die RanBP3L in der Expression induziert wird. Es ist nahe liegend, dass dies Expression über TonEBP reguliert wird. Mit Hilfe Transkriptionsfaktor Aktivitätsuntersuchungen und über die Analyse der Expression von RAnBP3L in TonEBP-KO-Zellen, soll dies bestätigt bzw. überprüft werden. Weiterhin werden wir mit Hilfe der MS-MS-Technologie Interaktionspartner von RanBP3L identifizieren, um darüber mehr über die zelluläre Funktion zu erhalten. Alle Untersuchungen dienen der besseren Charakterisierung von RanBP3L. Dieses Projekt soll dazu dienen einen Aspekt der Funktion von RanBP3L zu eruieren und perspektivisch die Basis für weitere Studien zu legen.